?E3連接酶篩選與驗(yàn)證? 通過酵母雙雜交、GST Pull-down或CRISPR篩選技術(shù)發(fā)現(xiàn)候選E3酶，再通過體外/體內(nèi)泛素化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其功能?17。 示例：研究KRAS突變時(shí)，發(fā)現(xiàn)USP25與RNF31調(diào)控KRAS的線性泛素化修飾?1。 ?泛素鏈類型分析? 利用特異性泛素抗體（如K48、K63鏈抗體）或串聯(lián)泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域（TUBEs）區(qū)分泛素鏈連接方式?36。

DMN誘導(dǎo)慢性肝炎動物模型：通常使用小鼠作為實(shí)驗(yàn)動物。實(shí)驗(yàn)方法包括適應(yīng)性飼養(yǎng)小鼠一段時(shí)間后，通過腹腔注射一定劑量的DMN，如14mg/kg，每三日或每隔4天注射一次，共注射若干次（如5次）。在注射后特定的時(shí)間點(diǎn)（如注射后第二天以及末次注射后的第十四天），取材觀察肝臟的變化?

骨性關(guān)節(jié)炎大小鼠動物模型：技術(shù)服務(wù)骨性關(guān)節(jié)炎背景介紹骨性關(guān)節(jié)炎是一種以關(guān)節(jié)軟骨的變性、破壞及骨質(zhì)增生為特征的慢性關(guān)節(jié)病。其發(fā)病過程中，關(guān)節(jié)軟骨逐漸失去原有的韌性、彈性和厚度，導(dǎo)致關(guān)節(jié)穩(wěn)定性下降，進(jìn)而引發(fā)一系列癥狀。二、骨性關(guān)節(jié)炎模型技術(shù)服務(wù) 骨性關(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis, OA）是一種常見的慢性關(guān)節(jié)疾病，主要影響中老年人。為了深入研究其病理機(jī)制、開發(fā)治療方法和評估藥物療效

MSP甲基化檢測：甲基化特異性PCR（Methylation-Specific PCR，MSP）是一種用于檢測DNA甲基化狀態(tài)的高靈敏度技術(shù)。其基本原理是利用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，使未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)化為niao嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶保持不變。隨后，設(shè)計(jì)針對甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過瓊脂糖凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物，從而確定DNA序列的甲基化狀態(tài)。

多囊卵巢動物模型在PCOS的研究中具有重要應(yīng)用價(jià)值，可用于探索疾病的發(fā)病機(jī)制、評估治療效果以及篩選潛在的治療藥物。然而，由于動物與人體在生理、病理等方面存在差異，因此動物模型在模擬PCOS方面仍存在一定的局限性

熒光素酶檢測是一種利用熒光素酶催化底物發(fā)光的特性來測定基因表達(dá)和調(diào)控的方法。這種方法在生物學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用，尤其適用于啟動子分析、轉(zhuǎn)錄因子 功能鑒定以及信號通路研究等領(lǐng)域。為了更深入地理解原理和應(yīng)用，可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行詳細(xì)分析：

熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒構(gòu)建實(shí)驗(yàn)的基本步驟 構(gòu)建熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒通常涉及以下幾個(gè)基本步驟： 1.設(shè)計(jì)引物：根據(jù)目標(biāo)序列設(shè)計(jì)特異性的引物，用于PCR擴(kuò)增含有感興趣調(diào)控區(qū)域的DNA片段。 2.PCR擴(kuò)增：使用設(shè)計(jì)的引物通過PCR擴(kuò)增目標(biāo)序列。 3.克隆到報(bào)告載體：將PCR擴(kuò)增得到的片段克隆到含有熒光素酶基因的報(bào)告載體中。這個(gè)載體通常包含一個(gè)或多個(gè)多克隆位點(diǎn)，用于插入目標(biāo)序列。

肺纖維化大小鼠動物模型：雄性SD大鼠，腹腔內(nèi)注射麻醉后，在額鏡直視下將導(dǎo)管插入氣管1-2cm，觀察到導(dǎo)管內(nèi)液柱隨動物呼吸波動后，按5mg/kg緩慢注入（BLM）制作肺纖維化模型。3d既有炎癥反應(yīng)。